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rna降解速度有yǒu 多快

2025-02-27 20:47:24Hotels

RNA部分降解的标本,是否,还能做,相对定量PCR?相对定量PCR是能做的,但是做出来的真实性就不敢保证了。通过内参基因的矫正,可以作为你后续实验的借鉴。但是如果是非常重要的结果,可能奠定你以后实验的思路的话,建议还是用新鲜的标本再做一次

RNA部分降解的标本,是否,还能做,相对定量PCR?

相对定量PCR是能做的,但是做出来的真实性就不敢保证了。通过内参基因的矫正,可以作为你后续实验的借鉴。但是如果是非常重要的结果,可能奠定你以后实验的思路的话,建议还是用新鲜的标本再做一次。最好是要验证RNA的完整性。做熟练了的话,很多时候一般……嗯……

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RNA部分降解的标本是否还能做相对定量PCR?

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以RNA为起始物可以直接做real time PCR吗?

RNA与DNA类似,在PCR时通过核酸互补配对原理与引物识别配对,从而进行扩增。因此只要符合碱基配对原则就能被识别扩增,所以RNA也能被引物识别进行PCR。但是,RNA一般是单链形式存的的分子,化学结构上比较不稳定,及其容易被RNA酶降解。而体外环境下,RNA酶无处不在,包括空气,手套上,容器表面等都有可能存在RNA酶。所以RNA会以一定的概率发生降解,PCR虽然比较灵敏,低量的模板就能被扩增,但是real-time PCR的目的是要对不同模板中的基因进行定量,若以RNA为模板,不同样本中的RNA降解速率可能不一致,因此真正参与real-time PCR反应的总RNA量无法保证一致,另外不同的基因降解速率可能也不一样,所以不建议以RNA为模板进行real-time PCR

最好将RNA先经过反转澳门伦敦人录成为cDNA再进行real-time PCR,并且要注意cDNA的低温保存,短期内在4度冰箱保存,长期存放[练:fàng]要放-20冰箱。

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