荧光定量用什么检测？定量PCR：以参照物为标准，对PCR终产物进行分析或对PCR过程进行监测，从而达到评估样本中靶基因的拷贝数，称为定量PCR。定量PCR的可行性定量一般是在PCR扩增的指数期进行的。常见荧光定量PCR方法比较SYBR Green I 检测模式SYBR Green I 是一种能与双链 DNA 结合发光的荧光染料
荧光定量用什么检测？
定量PCR：以参照物为标准，对PCR终产物进行分析或对PCR过程直播吧进行监测，从而达到评估样本中靶基因的拷贝数，称为定量PCR。定量PCR的可行性定量一般是在PCR扩增的指数期《qī》进行的。
常见荧【繁体：熒】光定量PCR方法比较
SYBR Green I 检测（繁：測）模式
SYBR Green I 是一【练：yī】种能与双链 DNA 结合发光的荧光染料。其与双链 澳门威尼斯人DNA 结合后， 荧光大大增强。因此， SYBR Green I 的荧光信号强度与双链 DNA 的数量相关，可以根据荧光信号检测出 PCR 体系存在的双链 DNA 数量。SYBR Green I 的最大吸收波长约为 497nm，发射波长最大约为 520nm。PCR 扩增程序一般为 94℃～55℃～72℃三步法，40 个循环
SYBR Green I 的缺点：由《练：yóu》于 SYBR Green I 没有特异性，不能识别特定的双链，只要是双链就会结合发光，对 PCR 反应中的非特异性(xìng)扩增或引物二(拼音：èr)聚体也会产生荧光，通常本底较高，所以在临床上使用可能会有假阳性发生。
SYBR Green I 的优点：SYBR Green I 的优点是因为其缺点产生，由于它能所有的双链DNA相结合，所以对不同模板不需特别定制不同的特异性探针，通用性较好，并且价{pinyin：jià}格相对较低。这[繁：這]对科研是很有利的，因此国内外在科研中使用比较普遍。
SYBR GREEN I work principle
水解探针[繁体：針]澳门永利模式#28Taqman探针#29
TaqMan 探针是(pinyin：shì)一种寡核苷酸探针，荧光基团连接在探《练：tàn》针的 5’末端， 而淬灭剂则在 3’末端。当探针与靶序列配对时，荧{繁：熒}光基团发射的荧光因与 3’端的淬灭剂接近而被淬灭。在进行延伸反应时，聚合酶的 5’外切酶活性将探针切断，使得荧光基团与淬灭剂分离，发射荧光。一分子的产物生成就伴随着一分子的荧光信号的产生。随着扩增循(xún)环数的增加，释放出来的荧光基团不断积累
因此 Taqma澳门金沙n 探针检测的是积累荧光。PCR 扩增程序通常是：94℃～60 ℃ 40 个循环。常用的荧（繁：熒）光基团是 FAM，TET，VIC，HEX。
Taqman work principle
杂交《练亚博体育：jiāo》探针模式#28Beacon、FRET#29
分子信标是一种呈发（繁：發）夹结构的茎环双标记寡核苷酸探针，两端的核酸序列互补配对，因此标记在一端的荧光基团与标记在另一端的淬灭基团紧紧靠近。荧光基团被激发后产生的光子被淬灭剂淬灭，由荧光基团产生的能量以红外而不是可见光形式释放出来。分子信标的茎环结构中，环一般为 15-30 个核苷酸长，并与目标序列互补茎一般 5-7 个核苷酸长，并相互配对形成茎的结构。荧光基团标记【pinyin：jì】在探针的一端，而淬灭剂则标记在另一端。在复性温度下，因为模板不存在时形成茎环结构，当加热变性会互补配对的茎环双链解开，如果有模板存（练：cún）在环序列将与模板配对
与模板配对后(繁：後)，分子信标将成链状而非发夹(jiā)状，使得荧光基团与淬灭剂分开。当荧光基团被激发时，因淬灭作用被解除，发出激发光子。由于是酶切作用的存在，分子信标也是积累荧光。常用的荧光基团：FAM ，Texas Red 。PCR 扩增程序通常是：94～55～72 ℃三步法，40 个循环
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