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重组《繁体:組》dna技术谁发现的

2025-03-27 13:58:37Home-FurnishingsHome

DNA的重组方式有哪些?1. 同源重组包括细菌接合、转化和转导。2位点特异性重组发生在两个特定序列之间。三。转位重组4。基因重排5。拷贝选择是RNA病毒使用的一种重组方法基本步骤1。获得目的基因的方法

DNA的重组方式有哪些?

1. 同源重组包括细菌接合、转化和转导。2位点特异性重组发生在两个特定序列之间。三。转位重组4。基因重排5

拷贝选择是RNA病毒{练:dú}使用的一种重组方法

基本步骤

1。获(繁:獲)得目的基因的方法

包括:基因文(piny直播吧in:wén)库(cDNA文库、基因组文库)、PCR(访问效应)、人工合成

2[目的基因与载体连接jiē ]方法如下:

-粘端-完全同源,定向澳门伦敦人克隆[pinyin:lóng](两种酶切)

定向(繁:嚮)克隆可以防止高背景的产生,因为完全同源性会导致载体自连接、重组子和目的基因自连接三种可[拼音:kě]能,重组子也可能有正插入和负插入,这使得筛选过程变得复杂。

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酶消化【h澳门博彩uà】后也可能产生末端,可能出现高背景。

-人工连接体-连接体(连接到带有粘性位点的片段,然后消化)、通用连接体(连接到片段的链成为【pinyin:wèi】粘性末端)、T-a克隆(PCR中使用的Taq聚合酶将根据模板延伸到链的末端,然后在链的末端添加a,可以通过将t加入Kron载体),均聚物尾(末端转移酶尾)反应体系:靶基因,载体,T4连(读:lián)接酶,缓冲液

3方法:氯化钙法:DNA及其形【读:xíng】成羟基磷酸钙复合物,抗DNA酶水解),真核(繁:覈)转染。

4筛选【练幸运飞艇:xuǎn】和鉴定

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方法(读:fǎ):遗传学(表型)-插入失活,蓝白筛选,耐药基因《pinyin:yīn》(四环素四环素、氨苄青霉素amp)

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-酶消化澳门博彩,电泳(分子量,概念《繁体:唸》)

-PCR(特异引物[拼音:wù])

-Southern blot

-免疫法(Western blot)]DNA测序(Sanger,焦磷酸测序【pinyin:xù】)

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