石蜡切片的基本原《拼音：yuán》理

石蜡切片的制作步骤（附图）？1、取材确定所取材料的来源及部位，纵切还是横切；取材要迅速，防止阻止发生进一步变化，材料体积要适宜，下图为植物芽体取样实拍。2、固定最常用的固定液为FAA（万用固定液）。它的优点是材料固定时间不受限制，固定时间短则数小时，长则数月或数年

石蜡切片的制作步骤（附图）？

1、取材

确定所取材料的来源及部位，纵切还是横切；取材要迅速[练：sù]，防止阻止发生进一步变《繁：變》化，材料体积要适宜，下图为植物芽体取样实《繁体：實》拍。

2、固定《练：dìng》

最常用的固定液为FAA（万用固定液）。它的优点是材料固（读：gù）定时间不受限制，固定时间短则数小时，长则数月或数年。冲洗或漂洗：组织固定后应充分水洗，除去留在组织内的固定液及其结晶沉淀，否则会影响以后的染色效果。下图为固定液浸泡《读：pào》的组《繁：組》织切块。

3、脱【繁体：脫】水

目的：水和透明剂不能互溶，只有yǒu 脱去水分后，才能让透明剂进入。

试剂：梯度酒精溶[练：róng]液

流程：70%---85%---95%--100%--- 100% 每步1h-2h左右《读：yòu》。

注意事项：保证脱水梯度（dù）和每一步脱水时间，水要完全脱净，但也不能过度脱水[练：shuǐ]（过久使组织变脆、收缩，这个时间大家可以根据自己的实验来摸索一下，不必完全按照本操作来）。

下图为自动组织脱水机，适于大量样品《拼音：开云体育pǐn》组织脱水用。如果材料体积及样品量较少可用小烧杯做容器来进行逐级脱水。

4、浸蜡与包{pinyin：bāo}埋

皇冠体育目【mù】的：用石蜡取代透明剂，使石蜡浸入组织而起支持作用。

浸jìn 蜡程序:#28恒温#29

（1）低温浸[练：jìn]蜡（36℃）：接上步，在有皇冠体育二甲苯和材料的烧杯中逐步加碎蜡至过饱和（石蜡不能溶解），过夜12-24h。

（2）高温浸蜡（55-60℃，高于《繁体：於》石蜡熔点3℃ ）：

将上步二甲苯与石蜡的混《拼音：hùn》合液倒出，不要倒掉材料，将烧杯中加入纯（繁体：純）石蜡，共5-24h。纯石蜡需要更换三【练：sān】次。

关于石蜡的选择石蜡熔点[繁：點]：

对于较硬的材料{pinyin：liào}，用熔点较高的石蜡进行包埋；

当切片较薄时（在8μm以下），选用熔点较高(pinyin：gāo)的石蜡包埋；

夏季【pinyin：jì】宜[pinyin：yí]采用熔点较高的石蜡（56，58℃），冬季宜选用熔点较低的石蜡（52，54℃）。

5、切片【读：piàn】

传统的切片方法是将包埋好的蜡块用yòng 刀(dāo)片（拼音：piàn）修成规整的梯形，粘于小木块上，上机切片。

新型的切片方法是将包埋框（见下图）代替木块的支（pinyin：zhī）撑作用，上机切片。切片的厚度可以根据自己的实验要求来确定，一般在8μm-20μm范围内。（下图为传统切片机《繁体：機》与新型自动切片机）

6、粘片与（繁体：與）烤片

粘片：用粘片剂将蜡片牢附于载玻片上，防止在后续的操作中材料脱落。在载玻片上涂抹粘片剂（甲液），再滴蒸馏水（乙液），放上蜡片，用滤纸吸取多余的水分。

烤片：将载玻片放于40℃展[zhǎn]片台中烤干。

7、脱蜡（繁体：蠟）与复水、染色

脱蜡目的：干燥后的切片需脱蜡及复水才能在水溶性{练：xìng}染液中进行染色。

复水目的：脱蜡后的材料，如果不经过复水，直(pinyin：zhí)接世界杯进入染色剂中，材料将会严重变形，甚至难以染色。

染色目的：使细胞组织内的【拼音：de】不同结构呈现不同的de 颜色和足够强的差异以便于观察。

总体流程：二甲苯→1/2 二甲苯 1/2纯酒精→100%酒精→95％酒精→85％酒精→番红（4h以上）→95％酒{练：jiǔ}精→固绿（迅速）→95％酒精（迅速）→100%酒精→1/2 二甲苯 1/2纯酒精→二甲苯→二甲苯，以上各级约需5～10分钟，已注明时间(jiān)的除外。

染色剂：1%番（pinyin：fān）红（85%酒精配制）

0.5%固（pinyin：gù）绿（95%酒精配制）

8、切片脱水（shuǐ）、透明和封固

接上步，在载玻片上滴加适量（1～2滴）中性树胶，再将洁净盖玻片倾斜放下，进行封片。切片放入42℃温箱中干燥过夜。镜澳门新葡京检，将合格的切（读：qiè）片贴上标签。封固剂选择加拿大树胶（Canada balsam）或中性树胶。至此，植物组织的石蜡切片大功告成！（下图为加拿大树胶）