DNA的重组方式有哪些？1. 同源重组包括细菌接合、转化和转导。2位点特异性重组发生在两个特定序列之间。三。转位重组4。基因重排5。拷贝选择是RNA病毒使用的一种重组方法基本步骤1。获得目的基因的方法
DNA的重组方式有哪些？
1. 同源重组包括细菌接合、转化和转导。2位点特异性重组发生在两个特定序列之间。三转位重组4。基因重排5。拷贝选择是RNA病毒使用的一种重组方{fāng}法
基本步骤(zhòu)
1。获得目的【练：de】基因的方法
包括：基因文库（cDNA文库、基因组文库）、PCR（访问效应）、人工{pinyin：gōng}合成
2[目的基因与载体连接（读：jiē）]方法如下：
-粘端-完全同源，定向克隆（两种酶切）
定向克(繁体：剋)隆可以防止高背景（读：jǐng）的产生，因为完全同源性会导致载体自连接、重组子和目{读：mù}的基因自连接三种可能，重组子也可能有正插入和负插入，这使得筛选过程变得复杂。
酶消化后也可能产生末{pinyin：mò}端，可能出现高背景。
-人工（gōng）连接体-连接体（连接到带有粘性位点的片段，然后消化（读：huà））、通用连接体（连接到片段的链成为粘性末端）、T-a克隆（PCR中使用的Taq聚合酶将根据模板延伸到链的末端，然后在链的末端添加a，可以通过将t加入Kron载体），均聚物尾（末端转移酶尾）反应体系：靶基因，载体，T4连接酶，缓冲液
3方法：氯化澳门银河钙法：DNA及其形成羟基磷酸钙复合物，抗DNA酶水{练：shuǐ}解），真核转染。
极速赛车/北京赛车4筛选{pinyin：xuǎn}和鉴定
方法：遗传（繁体：傳）学（表型《读：xíng》）-插入失活，蓝白筛选，耐药基因（四环素四环素、氨苄青霉素amp）
-酶消化，电泳（分(pinyin：fēn)子量，概念）
-PCR澳门银河（特异《繁体：異》引物）
开云体育-免疫法（Western blot）]DNA测《繁体：測》序（Sanger，焦磷酸测序）
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