为什么要两种酶才能切割基因(两端要不同的限制酶),不能是同一种吗?当切割目标基因时,同一个序列可以用相同的限制性酶切割,但有时也可以使用不同种类的限制性酶。限制性酶切的目的是保证靶基因与质粒(载体)的准确连接,避免过多的无效连接(如:靶基因与靶基因的连接、质粒自环化等)
为什么要两种酶才能切割基因(两端要不同的限制酶),不能是同一种吗?
当切割目标基因时,同一个序列可以用相同的限制性酶切割,但有时也可以使用不同种类的限制性酶。限制性酶切的目的是保证靶基因与质粒(载体)的准确连接,避免过多的无效连接(如:靶基因与靶基因的连接、质粒自环化等)。不同限制性酶切取同一序列的原理:虽然一种限制性酶只能识别一种特定的氨基酸序列,但可以包括两种限制性酶识别的序列例如,酶a识别ggatcc序列,而酶B识别GATC序列,则ggatcc序列可以被两个限制性酶切割。我记得我学这篇文章的时候没有说过,我不是说要把一个特定的基因转移到一个质粒中,用某种限制性酶切割质粒,用同样的限制性酶切割目标基因,然后根澳门威尼斯人据我的理解将目标基因与质粒“融合”,一定有一个明显的特征无标记基因。如果将目标基因插入其中,该基因将无法表(繁体:錶)达,导致某一代表性的消失
这种表现开云体育可以很容易地观察到,以便知道哪一个成功地转移到目标基因{练:yīn}中。
至于抗性基因,我学的时候没有这个概念。。。。
标记基因是什么?为何限制酶的切割位点在标记基因处,却不能把目的基因插在抗性基因初?
好吧,我犯了个错误。一般来说,要连接目的基因,需要使用相同或两种限制性酶来切割质粒和目标基因。在这个问题中,酶II的识别序列是酶I识别序列的一部分,如果用酶II处理质粒,它将在基因I和II区域被切断,质粒将变成两个线性序列。因此质粒只能被娱乐城酶Ⅰ消化,如果用酶Ⅰ处理靶基因,只有一段靶基因能与质粒相连(靶基因的左侧被酶Ⅰ切成粘端,质粒的基因Ⅰ区被酶Ⅰ切成粘端)。但目的基因的右端不能被酶消《xiāo》化,不能与质粒连接
幸运飞艇质粒经酶Ⅰ切(读:qiè)割后,在基因II区形成两个粘端(GATC),均为GATC。两者可以连接起来形成一个闭合的环。
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